Esta habitación se encuentra en la planta baja y está adaptada a personas de movilidad reducida. A través del personaje de Beatriz Núñez queremos dar a conocer el Convento de la Concepción, hoy Iglesia de Ntra. Sra. De Fátima, fundado en 1571 por Don García de Merlo y su esposa Beatriz Núñez. Dicho convento fue construido en un solar de la familia de Beatriz Núñez quien tiene su sepultura en el altar mayor.
Pedro Millán
Esta habitación situada en la planta alta y que tiene terraza propia recibe su nombre del sevillano imaginero Pedro Millán quien en el siglo XVI esculpió la imagen del Santo Cristo de la Reja, así llamado por tener su altar alzado sobre la reja de la capilla mayor de la iglesia conventual del antiguo monasterio de San Benito.
Isaac Abravanel
Esta luminosa habitación de la segunda planta nos lleva al pasado judío de Segura de León.
Según se cuenta la judería de Segura estaba ubicada entre las calles Castillo, Portugalejo, Santa Cruz y Mesones. Su sinagoga se levantó en la actual calle Castillo y contaba con soportal y un gran salón con coro reservado para las mujeres. Ha desaparecido. En esta judería vivió Isaac Abravanel en el año 1483, uno de los hombres más ricos y poderosos de Portugal que llegó perseguido de muerte por el rey Juan II. Fue ministro de finanzas de Reyes y nobles lusitanos, teólogo y líder de la comunidad judía
Hernán Mejías
Esta habitación situada en la planta baja y que da al patio, está dedicada a Hernán Mejías, importante segureño que pagó la llamada capilla de Hernán Mejías o del Sagrario que está en la parroquia de Ntra. Sra. De la Asunción. Dicha capilla cuenta con dos vidrieras y fue levantada con el oro procedente del tesoro de Atahualpa, ya que Diego Mejías, hijo del titular, participó en la conquista del Perú. Es de resaltar la reja plateresca de entrada a la capilla.
Garcilaso de la Vega
Esta magnífica habitación cuyo balcón tiene unas vistas excelentes al castillo Santiaguista, está dedicada al padre del poeta Garcilaso de la Vega. Garci Laso de la Vega fue comendador mayor y residió en el castillo entre los años 1504 y 1512. De su paso por el castillo queda la construcción que mandó realizar y que se conoce como cuarto de Garcilaso de la Vega. Quién sabe, pero quizás el niño Garcilaso pudo pasear por sus almenas y jugar en el patio de armas.
Alonso de Cárdenas
Don Alonso de Cárdenas fue el último Maestre de la Orden de Santiago y fue él quien hacía 1483 llevó a cabo las obras de consolidación del Castillo. Don Alonso acometió la edificación de una nueva muralla y también construyó la torre cilíndrica del ángulo nororiental y el baluarte de la puerta principal.